1、准备样品：将要测量的旋光物质制备成透明溶液或固体样品。溶液样品需要用溶剂稀释到适当的浓度，确保样品的透明度和均匀性。 调零：在旋光仪中，先进行调零操作。这一步是为了让仪器自动校准，以消除仪器本身的旋光度。
2、打开旋光仪电源，预热仪器10-15分钟。 将待测旋光液体倒入旋光仪样品池中，注意不要有明显的气泡和颗粒。 调整入射光线方向，使得光线垂直于样品池。 通过旋转样品池，使得旋光仪显示的数值最大。 记录旋转角度和旋光液体的密度，以便后期计算浓度。
3、实验二旋光仪测定溶液的浓度及旋光度【实验目的】加深对旋光现象的理解，观察线偏振光通过旋光物质的旋光现象。掌握旋光仪的构造原理和使用方法。测定糖溶液的比旋光率及其浓度。【实验仪器】WXG-4小型旋光仪烧杯蔗糖葡萄糖蒸馏水物理天平玻璃棒温度计等。
4、比旋光度=测得的旋光度/（L*C），可见，样品试管越长，L越大，相同比旋光度下，测得的旋光度越大，误差也就越小。
5、旋光度的计算公式如下：α（旋光度）= （α/角度） × c（质量浓度，g/ml）× l（旋光管长度，dm）/ t（温度，℃）/ λ（光波波长，如钠光用D表示）。例如，如果在1dm的旋光管中，含5g糖的100ml水溶液测得旋光角度为-64°，则旋光度为：-64°/（100ml * 5g/100ml）。
6、旋光计的检定：可用标准石英旋光管进行校正，读数误差应符合规定。测定方法。将测定管用供试液体或固体物质的溶液（取固体供试品，按各药品项下的方法制成）冲洗数次，缓缓注入供试液或溶液适量（注意勿使发生气泡），置于旋光计内检测读数，即得供试液的旋光度。
旋光度的测定：是利用平面偏振光通过含有某些光学活性物质（如具有不对称碳原子的化合物）的液体或溶液时发生的旋光现象来测量药物或检查药物的纯杂程度。
旋光度的测定如下：旋光度测定法，是利用平面偏振光通过含有某些光学活性物质（如具有不对称碳原子的化合物）的液体或溶液时发生的旋光现象来测量药物或检查药物的纯杂程度的方法，也可用来测定含量。主要用于：药物鉴别、杂质检查和含量测定。
旋光度的测定，是利用平面偏振光通过含有某些光学活性物质（如具有不对称碳原子的化合物）的液体或溶液时发生的旋光现象来测量药物或检查药物的纯杂程度的方法，也可用来测定含量。主要用于：药物鉴别、杂质检查和含量测定。仪器。旋光计：《中国药典》规定，应使用读数至0.01。并经过检定的旋光计。
旋光物质的旋光度主要取决于物质本身的结构。另外，还与光线透过物质的厚度，测量时所用光的波长和温度有关。如果被测物质是溶液，影响因素还包括物质的浓度，溶剂也有一定的影响。因此旋光物质的旋光度，在不同的条件下，测定结果通常不一样。
测定旋光度时如光通路上有气泡，会造成偏振光偏转角度误差。手性化合物的旋光度可用旋光仪来测定。其基本原理为从钠光源发出的光，通过一个固定的Nikol棱镜-起偏镜变成平面偏振光。平面偏振光通过装有旋光物质的盛液管时，偏振光的振动平面会向左或向右旋转一定的角度。
旋光现象：当光线通过某些物质时，物质会使通过它的光线发生偏转，这种偏转现象称为旋光现象。具有旋光特性的物质称为光学活性物质。旋光度的定义：旋光度是光学活性物质对入射光偏转的角度，是描述物质旋光特性的量度。
旋光法测定物质含量的原理如下：旋光度测定法，是利用平面偏振光通过含有某些光学活性物质的液体或溶液时发生的旋光现象来测量药物或检查药物的纯杂程度的方法，也可用来测定含量。
旋光度的测定作用：旋光法可用于各种光学活性物质的定量测定或纯度检验，将样品在指定的溶剂中配成一定浓度的溶液。研究旋光性物质的反应机理.测定旋光性物质的反应速率常数等.有些旋光性的物质左旋或者右旋表现的生物学作用不同，比如葡萄糖的生理作用，氯酶素等。
光源发射的光被光栅过滤发生偏振，即过滤了所有不按设定角度倾斜的光波。然后，被引导到第二个旋光片（即分析器，与第一个成90°转角）。因此没有光线会到达置于后面的探测器。但是，如果放一光学活性的物质在两旋光片之间，光波会根据分子结构向左或向右倾斜，光会再次落在检测器上。